தயாரிப்புகள்

மனித குடல் சிம்பியண்டில் உள்ள ஆல்பா-மன்னோசிடேஸ்களின் Ca2+-சார்ந்த குடும்பத்தின் இயக்கவியல் நுண்ணறிவு.

பெருங்குடல் பாக்டீரியா, பாக்டீராய்டுகள் தீட்டாயோடாமிக்ரான் மூலம் எடுத்துக்காட்டப்பட்டது, உணவு பாலிசாக்கரைடுகள் மற்றும் ஹோஸ்ட் கிளைக்கான்களை ஊட்டச்சத்துக்களாகப் பயன்படுத்துவதற்கு கிளைகோசைட் ஹைட்ரோலேஸின் (GHs) பெரிய குடும்பங்களைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் மனித ஆரோக்கியத்தை பராமரிப்பதில் முக்கிய பங்கு வகிக்கிறது.இத்தகைய GH குடும்ப விரிவாக்கம் B. thetaiotaomicron மரபணுவால் குறியிடப்பட்ட 23 குடும்ப GH92 கிளைகோசிடேஸ்களால் எடுத்துக்காட்டுகிறது.ஹோஸ்ட் என்-கிளைகான்களைப் பயன்படுத்த ஒற்றை இடப்பெயர்ச்சி பொறிமுறையின் மூலம் செயல்படும் ஆல்பா-மன்னோசிடேஸ்கள் என்பதை இங்கே காட்டுகிறோம்.இரண்டு GH92 மன்னோசிடேஸ்களின் முப்பரிமாண அமைப்பு இரண்டு டொமைன் புரதங்களின் குடும்பத்தை வரையறுக்கிறது, இதில் வினையூக்கி மையம் டொமைன் இடைமுகத்தில் அமைந்துள்ளது, இது Ca(2+)-ல் நீராற்பகுப்புக்கு அமிலம் (குளுட்டமேட்) மற்றும் அடிப்படை (அஸ்பார்டேட்) உதவியை வழங்குகிறது. சார்பு முறை.தடுப்பான்களுடன் சிக்கலான GH92 களின் முப்பரிமாண கட்டமைப்புகள், வினையூக்கத்தின் தனித்தன்மை, பொறிமுறை மற்றும் இணக்கப் பயணத்தின் நுண்ணறிவை வழங்குகின்றன.Ca(2+) ஆனது மன்னோசைடை அதன் தரை-நிலை (4)C(1) நாற்காலி இணக்கத்திலிருந்து மாற்ற நிலையை நோக்கி சிதைக்க உதவுவதில் முக்கிய வினையூக்கப் பங்கு வகிக்கிறது. (நூல் பட்டியல்: Nat.செம்.உயிரியல்6, 125-32, (2010)

ஒரு கான்கனாவலின் ஏ-செபரோஸ் நெடுவரிசையில் ஓவல்புமின் கிளைகோஸ்பாரகின்களின் ஃப்ரண்டல் அஃபினிட்டி குரோமடோகிராபி.லெக்டினின் பிணைப்புத் தனித்தன்மையின் அளவு ஆய்வு.

ஓவல்புமினிலிருந்து பெறப்பட்ட 10 கிளைகோஸ்பாரகின்களுடன் செபரோஸ் 4B-இம்மொபைலைஸ்டு கான்கனாவலின் A (ConA) இன் இடைவினைகள் முன்பக்க அஃபினிட்டி க்ரோமடோகிராஃபி மூலம் அளவுகோலாக ஆராயப்பட்டன.இந்த முறையில், ஒரு கார்போஹைட்ரேட் கரைசல் ConA-Sepharose பத்தியில் தொடர்ச்சியாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது மற்றும் எலுஷன் முன்பகுதியின் பின்னடைவு தொடர்புகளின் வலிமையின் அளவுருவாக அளவிடப்படுகிறது.ConA உடன் ஒவ்வொரு சாக்கரைடுக்கும் விலகல் மாறிலி (Kd) தீர்மானிக்கப்படலாம்.p-nitrophenyl-alpha,D-mannoside இன் பிணைப்பின் பகுப்பாய்வு, செபரோஸ் 4B இல் அசையாத பிறகு, ConA இன் பிணைப்பு பண்புகள் அடிப்படையில் மாறாது என்பதைக் காட்டுகிறது.ஓவல்புமின் கிளைகோஸ்பாரகின்கள் ஒவ்வொன்றும் டிரிடியம் மூலம் பகுப்பாய்வுக்காக குறைக்கும் மெத்திலேஷன் முறையால் பெயரிடப்பட்டது.பெறப்பட்ட Kd மதிப்புகளின் ஒப்பீடு, கோனாவின் பிணைப்பு கிளைகோசைல் சங்கிலியின் மிக சிறிய கட்டமைப்பு வேறுபாடுகளுடன் கணிசமாக வேறுபடுகிறது என்பதைக் காட்டுகிறது.C-6-இணைக்கப்பட்ட மேனோஸின் C-3 நிலையில் குறைந்தபட்சம் ஒரு ஹைட்ராக்சில் குழுவான மேன் ஆல்பா 1-6(மேன் ஆல்பா 1-3)Man என்ற குறிப்பிட்ட கிளைகோசில் சங்கிலி அமைப்பை ConA அங்கீகரிக்கிறது என்று முடிவுகள் தெரிவிக்கின்றன.