தயாரிப்புகள்

ஆந்த்ரானிலிக் அமிலம் மற்றும் ஃப்ளோரசன்ஸைக் கண்டறிதல் ஆகியவற்றின் அடிப்படையில் கிளைகோசைல்ட்ரான்ஸ்ஃபெரேஸ்களுக்கான புதிய உயர் செயல்திறன் திரவ நிறமூர்த்த மதிப்பீடு.

உயர் செயல்திறன் திரவத்தால் β1-4 கேலக்டோசில்ட்ரான்ஸ்ஃபெரேஸ் (GalT-1) மற்றும் α2-6 சியாலில்ட்ரான்ஸ்ஃபெரேஸ் (ST-6) ஆகிய இரண்டின் செயல்பாடுகளை அளவிடுவதற்கு 2-அமினோபென்சோயிக் அமிலத்தின் (2AA; ஆந்த்ரானிலிக் அமிலம், AA) தனித்துவமான லேபிளிங் வேதியியலைப் பயன்படுத்தி மதிப்பீடுகள் உருவாக்கப்பட்டன. ஒளிர்வு கண்டறிதலுடன் கூடிய குரோமடோகிராபி (HPLC) (அனுமுலா KR. 2006. கிளைகோபுரோட்டீன் கார்போஹைட்ரேட்டுகளின் உயர் செயல்திறன் கொண்ட திரவ நிறமூர்த்த பகுப்பாய்வுக்கான ஒளிர்வு வழித்தோன்றல் முறைகளில் முன்னேற்றங்கள். குத உயிர்வேதியியல். 350:1-23).N-Acetylglucosamine (GlcNAc) மற்றும் N-acetyllactosamine ஏற்பிகளாகவும், யூரிடின் டைபாஸ்பேட் (UDP) -கேலக்டோஸ் மற்றும் சைடிடின் மோனோபாஸ்பேட் (CMP) -N-acetylneuraminic அமிலம் (NANA) முறையே GalT-1 மற்றும் ST-6 க்கு நன்கொடையாளர்களாகவும் பயன்படுத்தப்பட்டன.நொதி தயாரிப்புகள் AA உடன் சிட்டுவில் லேபிளிடப்பட்டன மற்றும் TSKgel Amide 80 நெடுவரிசையில் உள்ள அடி மூலக்கூறுகளிலிருந்து சாதாரண-கட்ட நிலைமைகளைப் பயன்படுத்தி பிரிக்கப்பட்டன.Gal-β1-4GlcNAc மற்றும் NANA-α2-6 Gal-β1-4GlcNAc ஆகியவற்றுடன் ஒப்பிடுவதன் மூலம் என்சைம் அலகுகள் உச்சப் பகுதிகளிலிருந்து தீர்மானிக்கப்பட்டது.நேர்கோட்டுத்தன்மை (நேரம் மற்றும் நொதி செறிவு), துல்லியம் (உள் மற்றும் இடையாய்வு) மற்றும் மதிப்பீடுகளுக்கான மறுஉருவாக்கம் ஆகியவை நிறுவப்பட்டன.தனிமைப்படுத்துதல் மற்றும் சுத்திகரிப்பு ஆகியவற்றின் போது என்சைம் செயல்பாடுகளைக் கண்காணிப்பதில் மதிப்பீடுகள் பயனுள்ளதாக இருப்பதாகக் கண்டறியப்பட்டது.மதிப்பீடுகள் அதிக உணர்திறன் கொண்டவை மற்றும் பாரம்பரிய கதிரியக்க சர்க்கரை அடிப்படையிலான அளவீடுகளுக்கு சமமாக அல்லது சிறப்பாக செயல்பட்டன.கார்போஹைட்ரேட் ஏற்பிகள் லேபிளிங்கிற்கான குறைக்கும் முடிவைக் கொண்டிருக்கும் பட்சத்தில், மற்ற இடமாற்றங்களின் செயல்பாட்டை அளவிடுவதற்கு மதிப்பீட்டு வடிவம் பயன்படுத்தப்படலாம்.கிளைகோபுரோட்டீன் ஏற்பிகளுக்கான மதிப்பீடு IgG ஐப் பயன்படுத்தி உருவாக்கப்பட்டது.IgG கிளைக்கான்களைப் பிரிப்பதற்காக ஒரு குறுகிய HPLC விவரக்குறிப்பு முறை உருவாக்கப்பட்டது (பையான்டெனரி G0, G1, G2, mono- மற்றும் disialylated), இது GalT-1 மற்றும் ST-6 செயல்பாடுகளை விரைவான முறையில் தீர்மானிக்க உதவியது.மேலும், மருத்துவ அமைப்புகளில் IgG கிளைக்கான்களில் ஏற்படும் மாற்றங்களைக் கண்காணிப்பதற்கு இந்த விவரக்குறிப்பு முறை பயனுள்ளதாக இருக்கும்.