தயாரிப்புகள்

யூகாரியோடிக் செல்கள் நான்கு டிஆக்சிரைபோநியூக்ளியோசைட் ட்ரைபாஸ்பேட்டுகளின் (dNTPs) நிமிட அளவுகளின் ஒரு நுட்பமான சமநிலையைக் கொண்டிருக்கின்றன, இது DNA நகலெடுக்க சில நிமிடங்களுக்கு மட்டுமே போதுமானது.ஒரு டிஎன்டிபியின் குறைபாடு மற்றும் உபரி ஆகிய இரண்டும் கூடுதலான பிறழ்வு விகிதங்கள், தவறான டிஎன்ஏ பழுது அல்லது மைட்டோகாண்ட்ரியல் டிஎன்ஏ சிதைவை ஏற்படுத்தலாம்.dNTPகள் பொதுவாக ஒரு நொதி மதிப்பீட்டின் மூலம் அளவிடப்படுகின்றன, இதில் கதிரியக்க dATP (அல்லது dATPக்கான மதிப்பீட்டில் கதிரியக்க dTTP) ஒரு DNA பாலிமரேஸ் மூலம் குறிப்பிட்ட செயற்கை ஒலிகோநியூக்ளியோடைடுகளில் சேர்ப்பது தெரியாத dNTPயின் செறிவுக்கு விகிதாசாரமாகும்.பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் க்ளெனோ டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ், அறியப்படாத டிஎன்டிபிக்கு தொடர்புடைய ரிபோநியூக்ளியோடைடுக்குப் பதிலாக சில சந்தர்ப்பங்களில் டிஎன்டிபிகளின் அதிக மதிப்பீட்டிற்கு வழிவகுக்கலாம்.ரைபோநியூக்ளியோடைடு ஒருங்கிணைப்பைத் தவிர்க்கும் ஒவ்வொரு டிஎன்டிபிக்கான மதிப்பீடு நிலைமைகளை இப்போது விவரிக்கிறோம்.dTTP மற்றும் dATP மதிப்பீடுகளுக்கு, Klenow என்சைம் மற்றும் dATP (அல்லது dTTP) என்று பெயரிடப்பட்ட செறிவுகளைக் குறைக்க இது போதுமானது;dCTP மற்றும் dGTP க்கு நாம் t he Klenow நொதியை Taq DNA பாலிமரேஸ் அல்லது தெர்மோ சீக்வெனேஸ் மூலம் மாற்ற வேண்டும்.சில முந்தைய அறிக்கைகளில் ரிபோநியூக்ளியோடைடு ஒருங்கிணைப்பு dGTP மற்றும் dCTP க்கு மிக அதிக மதிப்புகளை ஏற்படுத்தியிருக்கலாம் என்று நாங்கள் பரிந்துரைக்கிறோம்.