தயாரிப்புகள்

5-ஃப்ளோரூராசில் (5-FU) மற்றும் இரண்டு எண்டோஜெனஸ் மோனோபாஸ்பேட் நியூக்ளியோடைடுகளின் பல வளர்சிதை மாற்றங்களை குறிப்பாக அளவிட, திரவ குரோமடோகிராபி-டேண்டம் மாஸ் ஸ்பெக்ட்ரோமெட்ரி (LC-MS/MS) அடிப்படையில் அசல் முறையை உருவாக்கினோம்.5-FU அல்லது 5-fluoro-2′-deoxyuridine (5-FdUrd) இலிருந்து 5-ஃப்ளூரோ-2′-டியோக்ஸியூரிடைன்-5′-மோனோபாஸ்பேட் (5-FdUMP) இன் உள்செல்லுலார் உற்பத்தியை தீர்மானிக்க இந்த மதிப்பீடு அனுமதித்தது. , (ii) 5-FdUMP செறிவின் தாக்கம் 2′-deoxyuridine-5′-monophosphate (dUMP)/thymidine-5′-monophosphate (TMP) விகிதம், மற்றும் (iii) 5-FdUMP இன் சுரப்பு அளவு மற்றும் ஏபிசி டிரான்ஸ்போர்ட்டர்களால் மனித வளர்ப்பு செல்களிலிருந்து 5-FU.எங்கள் சோதனை நிலைமைகளின் கீழ், செல்கள் 5-FU அல்லது 5-FUrd உடன் அடைக்கப்பட்டுள்ளன.பின்னர், செல்லுலார் புரதங்கள் மெத்தனால் மூலம் துரிதப்படுத்தப்பட்டன.இந்த செயல்முறை அதிக பிரித்தெடுத்தல் மீட்பு வழங்கியது.கூடுதலாக, உயிரணுக்களிலிருந்து 5-FU மற்றும் 5-FdUMP சுரப்பை அளவிட, கலாச்சார ஊடகத்தில் இந்த மூலக்கூறுகளின் அளவை நாங்கள் மேற்கொண்டோம்.ஊடகங்கள் நேரடியாக உட்செலுத்தப்பட்டன (5-FU) அல்லது ஒயாசிஸ் மெழுகு பிரித்தெடுத்தல் கெட்டியை (5-FdUMP) பயன்படுத்தி ஒரு திடமான கட்ட பிரித்தெடுத்தலுக்கு கீழ் சென்றது.dC18 அட்லாண்டிஸ் 3.5 μm, (100 மிமீ × 2.1 மிமீ ஐடி) நெடுவரிசையில் அமோனியம் ஃபார்மேட் பஃபர்/மெத்தனால்/நீர் (5/5/90, v/v) ஐப் பயன்படுத்தி ஐசோக்ரேடிக் பயன்முறையில் பகுப்பாய்வுகளைப் பிரித்தல் செய்யப்பட்டது.இயக்க நேரம் 6.2 நிமிடங்களுக்கு மேல் இல்லை.எதிர்மறை அயன் பயன்முறையின் கீழ் எலக்ட்ரோஸ்ப்ரே இடைமுகத்தில் பகுப்பாய்வுகள் அயனியாக்கம் செய்யப்பட்டன.சேர்மங்களின்படி 2.5–150 ng mL -1 வரம்பில் முறையைச் சரிபார்த்தோம்.ஏழு நாட்களில் உள் மற்றும் இடை-மதிப்பீட்டு மாறுபாடு 10% க்கும் குறைவாக இருந்தது.மாதிரிகள் குறைந்தது இரண்டு வாரங்களுக்கு −20 °C இல் சேமிக்கப்படும் போது மற்றும் மூன்று முடக்கம்-கரை சுழற்சிகளுக்குப் பிறகு அனைத்து சேர்மங்களும் செல்கள் அல்லது கலாச்சார ஊடகத்தில் நிலையானதாக இருக்கும்.இரண்டு ஊடகங்களிலும் மேட்ரிக்ஸ் விளைவு காணப்படவில்லை.